Набор для синтеза кДНК SuperScript III CellsDirect оптимизирован для синтеза первой цепи кДНК непосредственно из лизата клеток млекопитающих без предварительного выделения РНК. Лизис и обратная транскрипция выполняются в одной и той же пробирке, а полученная первая цепь кДНК готова к использованию в клонировании и ПЦР.

Особенности набора SuperScript III CellsDirect Synthesis Kit включают:
• Совместимость с широким спектром типов клеток млекопитающих, выращенных в различных условиях обработки
• Формат одной пробирки сводит к минимуму потерю реагентов, потерю образцов и время обработки
• Общий объем лизата используется в реакции синтеза первой цепи кДНК, обеспечивая более высокие выходы при ограниченном количестве клеток и позволяя обнаруживать редкие транскрипты
• Обратная транскриптаза SuperScript III с пониженной активностью РНКазы H и более высокой термостабильностью обеспечивает высокий выход кДНК в реакции синтеза первой цепи для большей чувствительности и улучшенного обнаружения редких транскриптов
• Генерирует высококачественную кДНК для использования в различных приложениях, включая клонирование и ПЦР
• Простой протокол занимает менее двух часов

Как это работает
В традиционной ОТ-ПЦР РНК сначала выделяется из клеток в ходе длительной процедуры, которая может привести к потере материала. Используя набор для синтеза кДНК SuperScript III CellsDirect, клетки лизируются, и кДНК генерируется из лизата в одной пробирке с минимальной обработкой и без потери образца. ДНКаза I добавляется для устранения геномной ДНК перед синтезом первой цепи. Этот набор был оптимизирован для небольших образцов клеток, от 10 000 клеток до одной клетки (измерено путем серийного разбавления). Использование обратной транскриптазы SuperScript III обеспечивает высокую специфичность и высокий выход кДНК из небольших количеств исходного материала (всего 10 пг общей РНК). После синтеза кДНК первой цепи может быть амплифицирована с помощью специфических праймеров с помощью ПЦР без промежуточных органических экстракций или осаждения этанолом.