Обратная транскриптаза M-MLV — это рекомбинантная ДНК-полимераза, которая синтезирует комплементарную цепь ДНК из одноцепочечной РНК, ДНК или гибрида РНК:ДНК. По сравнению с ОТ AMV, обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей Молони (ОТ M-MLV) не обладает активностью эндонуклеазы ДНК и имеет более низкую активность РНКазы H.

Одна единица ОТ M-MLV — это количество фермента, необходимое для включения 1 нмоля дезоксирибонуклеотида в осаждаемый кислотой материал за 10 мин при 37°C с использованием поли(А) олиго(dT) 25 в качестве шаблона-праймера.

Особенности обратной транскриптазы M-MLV включают:
• Превосходная термостабильность с оптимальной активностью при 37 °C
• Может использоваться для синтеза первой цепи кДНК размером до 7 кб
• Множество применений, включая синтез первой цепи кДНК, удлинение праймера, секвенирование двухцепочечной ДНК, библиотек кДНК и ОТ-ПЦР

Источник
Очищено от E. coli , экспрессирующей ген pol M-MLV на плазмиде

Производительность и качество тестирования
чистоты SDS-PAGE; анализы эндодезоксирибонуклеазы, экзодезоксирибонуклеазы и рибонуклеазы; и выход и длина продукта кДНК

Условия реакции
50 мМ Трис-HCl (pH 8,3), 40 мМ KCl, 6 мМ MgCl 2 , 1 мМ ДТТ, 0,5 мМ [ 3 H]dTTP, 0,1 мМ поли(А), 0,1 мМ олиго(dT) 25 , 0,1 мг/мл БСА и фермент в 50 мкл в течение 10 мин при 37°C