Клетки Ишикавы (клеточная линия аденокарциномы эндометрия человека) культивировались согласно стандартному протоколу. Культуральную среду аспирировали, а клетки промывали HBSS без Ca и Mg. Клетки обрабатывали 0,25% трипсином и инкубировали при 37° в течение 5 минут. Клетки аспирировали и осаждали при 900 xg в течение 5 минут. Клетки дважды промывали PBS. Затем клетки фиксировали 4% параформальдегидом в PBS в течение 15 минут при комнатной температуре. Затем клетки промывали, как указано ранее. Пермеабилизацию и блокировку проводили путем инкубации в 5% BSA и 0,1% Triton-X в PBS в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем клетки промывали, как указано ранее. Первичное антитело для OXTR ( продукт № PA5-19038 ) использовали в разведении 1:200 в 5% растворе BSA, PBS и инкубировали в течение 120 минут при комнатной температуре. Клетки промывали, как указано ранее. Вторичное антитело Alexa 488 ( продукт № A-11055 ) использовали в разведении 1:2000 в 5% растворе BSA, PBS и инкубировали в темноте в течение 45 минут. Клетки промывали и ресуспендировали в PBS и анализировали с помощью проточной цитометрии. Данные любезно предоставлены Программой обмена данными об антителах.