Thermo Scientific Proteinase K — это эндолитическая протеаза широкого спектра действия, широко используемая для переваривания белков в препаратах нуклеиновых кислот. Она расщепляет белки даже в присутствии детергентов. Протеиназа K расщепляет пептидные связи на карбоксильных сторонах алифатических, ароматических или гидрофобных аминокислот. Протеиназа K классифицируется как сериновая протеаза. Наименьший пептид, гидролизуемый этим ферментом, — тетрапептид.

Основные характеристики

• Готовый к использованию раствор
• Активен в широком диапазоне условий реакции

Применение

• Выделение геномной ДНК из хвоста мыши
• Выделение геномной ДНК из культивируемых клеток
• Удаление ДНКаз и РНКаз при выделении ДНК и РНК из тканей или клеточных линий
• Определение локализации фермента
• Повышение эффективности клонирования продуктов ПЦР

Примечание

• Рекомендуемая рабочая концентрация протеиназы K составляет от 0,05 до 1 мг/мл. Активность фермента стимулируется 0,2–1% SDS или 1–4 М мочевиной.
• Ca2+ защищает протеиназу К от автолиза, повышает термическую стабильность и выполняет регуляторную функцию для участка связывания субстрата протеиназы К.
• Стабилен в широком диапазоне pH: от 4,0 до 12,5, оптимальное значение pH от 7,5 до 8,0.
• Оптимальная активность при температуре от 50 до 55 °C.
• Быстрая денатурация фермента происходит при температуре выше 65 °C.