Thermo Scientific Pierce IPTG — это изопропил-β-D-тиогалактопиранозид для использования с субстратами бета-галактозидазы, такими как X-Gal, для обнаружения экспрессии векторов, плазмид или фрагментов ДНК, содержащих репортерный ген.

Реагент X-Gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид) — это хромогенный субстрат для β-галактозидазы, который дает синий осадок, растворим в ДМФ и может использоваться для обнаружения векторов, плазмид или фрагментов ДНК, содержащих ген β-галактозидазы.

IPTG (изопропил-β-D-тиогалактопиранозид) может использоваться для максимизации экспрессии генов в векторах экспрессии. При скрининге библиотеки бактериофага лямбда с помощью антитела вероятность успеха можно увеличить, предотвратив экспрессию белка слияния до тех пор, пока бляшки не будут хорошо установлены. Поместив нитроцеллюлозный фильтр, содержащий индуктор IPTG, на пластину и продолжая рост при 37°C, можно вызвать экспрессию потенциального белка слияния β-галактозидазы-кДНК через 3-4 часа роста бляшки. Затем нитроцеллюлозный фильтр проверяют антителами. IPTG также используют в сочетании с X-Gal для обнаружения активной β-галактозидазы и практично в приложениях с использованием векторов бактериофага M13 и Igt11.

Характеристики IPTG:

• X-Gal дает интенсивный синий осадок для обнаружения экспрессии β-галактозидазы
• Может сочетаться с IPTG для селективного максимизирования обнаружения β-галактозидазы