Thermo Scientific T4 DNA Ligase катализирует образование фосфодиэфирной связи между соседними 5'-фосфатными и 3'-гидроксильными концами в дуплексной ДНК или РНК. Фермент восстанавливает одноцепочечные разрывы в дуплексной ДНК, РНК или гибридах ДНК/РНК. Он также соединяет фрагменты ДНК с помощью липких или тупых концов, но не проявляет активности в отношении одноцепочечных нуклеиновых кислот.

T4 DNA Ligase требует АТФ в качестве кофактора.

Основные моменты

• Активен в рестриктазах Themo Scientific, буферах для ПЦР и ОТ (при добавлении АТФ)
• Быстро — лигирование липких концов завершается за 10 минут при комнатной температуре
• Поставляется с раствором ПЭГ для эффективного лигирования тупых концов

Применение

• Клонирование фрагментов ДНК, полученных с помощью рестриктаз
• Клонирование продуктов ПЦР
• Присоединение двухцепочечных олигонуклеотидных линкеров или адаптеров к ДНК
• Направленный мутагенез
• Полиморфизм длины амплифицированных фрагментов (AFLP)
• Лигазо-опосредованное обнаружение РНК ( см. ссылку 3)
• Ремонт никелей в дуплексной ДНК, РНК или гибридах ДНК/РНК
• Самоциркуляризация линейной ДНК.

Включает

• ДНК-лигазу Т4
• 10-кратный буфер ДНК-лигазы Т4
• 50% раствор ПЭГ