Набор PureLink™ HiPure Plasmid FP (фильтр и осадитель) Maxiprep выделяет плазмидную ДНК из клеточного осадка в сверхчистую ДНК менее чем за один час. Используя фильтрующие колонки HiPure и осадители HiPure, входящие в комплект, вы можете очистить плазмидную ДНК без этапов центрифугирования, требуемых в традиционных протоколах выделения. Качество очищенной плазмидной ДНК эквивалентно качеству, полученному при двух проходах через градиенты хлорида цезия — наиболее строгом методе очистки ДНК — что делает его пригодным для трансфекции и других применений, требующих высокочистой плазмидной ДНК.

Набор PureLink™ HiPure Plasmid FP Maxiprep (таблица 1) обеспечивает:
• Простые протоколы — очистка бактериального лизата и осаждение изопропанолом без центрифугирования
• Быстрые результаты — от осадка клеток E. coli до высокочистой плазмидной ДНК для трансфекции примерно за 60 минут
• Высокий выход — до 850 мкг из высококопийной плазмиды

Как это работает
Набор PureLink™ HiPure Plasmid FP Maxiprep использует метод щелочного лизиса для подготовки и быстрой очистки бактериальных лизатов без необходимости центрифугирования (рисунок 1). Уникальная фильтрующая колонка HiPure включает картридж для фильтрации лизата, встроенный в анионообменную колонку для одноэтапной очистки лизата и связывания плазмидной ДНК. Примеси, такие как РНК, белки и другие загрязняющие вещества, удаляются одной промывкой, а сверхчистая плазмидная ДНК элюируется буфером с высоким содержанием соли. Для осаждения и обессоливания ДНК к элюированной ДНК добавляется изопропанол, а затем смесь наносится на HiPure Precipitator с помощью большого шприца. После последующего этапа промывки и сушки плазмидная ДНК легко элюируется из HiPure Precipitator буфером TE или водой. Использование осадителя устраняет необходимость центрифугирования, что снижает риск потери осадка ДНК во время удаления супернатанта и экономит время. Полученная ДНК готова к использованию в самых сложных приложениях. Весь протокол — от осадка клеток E. coli до сверхчистой плазмидной ДНК трансфекционного качества — может быть завершен примерно за час.