Исследования перемещения и расположения клеток требуют специализированных зондов, которые нетоксичны для живых клеток и хорошо удерживаются, что позволяет проводить многопоколенческое отслеживание. Флуоресцентные зонды CellTracker доступны в диапазоне флуоресцентных цветов для соответствия лазерам и фильтрам инструментов, а также для совместного окрашивания антителами или другими зондами для анализа клеток. Эти красители являются отличными инструментами для мониторинга перемещения, расположения, пролиферации, миграции, хемотаксиса и инвазии клеток.
Особенности красителей CellTracker включают:
• Простота использования — удалите культуральную среду, добавьте краситель, инкубируйте 15–45 минут и создавайте изображения клеток
• Превосходное удержание — удержание флуоресцентного сигнала >72 часов (обычно от трех до шести поколений)
• Идеальные красители для отслеживания — отслеживают движение клеток, местоположение, пролиферацию, миграцию, хемотаксис и инвазию
• Низкая цитотоксичность — не влияет на жизнеспособность или пролиферацию
• Универсальность клеток — работает с клетками в суспензии и адгезивными клетками

Флуоресцентные зонды CellTracker были разработаны для свободного прохождения через клеточные мембраны; однако, попав внутрь клетки, они трансформируются в непроницаемые для клеток продукты реакции. Флуоресцентные зонды CellTracker (за исключением CellTracker Deep Red) содержат хлорметильную или бромметильную группу, которая реагирует с тиоловыми группами, используя реакцию, опосредованную глутатион-S-трансферазой. В большинстве клеток уровень глутатиона высок (до 10 мМ), а глутатионтрансфераза встречается повсеместно. Зонд CellTracker Deep Red содержит реактивную группу сукцинимидилового эфира, которая реагирует с аминогруппами, присутствующими в белках.

После преобразования в непроницаемые версии флуоресцентные зонды CellTracker хорошо сохраняются в живых клетках в течение нескольких поколений. Зонды переносятся в дочерние клетки, но не переносятся в соседние клетки в популяции. Клетки, загруженные флуоресцентными зондами CellTracker, демонстрируют флуоресценцию в течение не менее 72 часов и демонстрируют идеальные свойства отслеживающего красителя — они стабильны, нетоксичны в рабочих концентрациях, хорошо удерживаются в клетках и ярко флуоресцируют при физиологическом pH. Кроме того, доступно несколько флуоресцентных зондов CellTracker с различными спектрами возбуждения и испускания, что позволяет мультиплексировать при флуоресцентной визуализации. Красители CellTracker удерживаются с помощью фиксации и пермеабилизации, что позволяет использовать их с антителами для приложений флуоресцентного иммуноокрашивания.

Спектральные характеристики флуоресцентных зондов CellTracker:
• CellTracker Blue CMAC —353/466 нм
• CellTracker Blue CMF2HC —371/464 нм
• CellTracker Blue CMHC —372/470 нм
• CellTracker Violet BMQC —415/516 нм
• CellTracker Green CMFDA —492/517 нм
• CellTracker Green BODIPY™ —522/529 нм
• CellTracker Orange CMTMR —541/565 нм
• CellTracker Orange CMR —548/576 нм
• CellTracker Red CMTPX —577/602 нм
• CellTracker Deep Red —630/660 нм

Флуоресцентные реагенты CellTracker включают синие флуоресцентные хлорметильные производные амино-, гидрокси- и дифторгидроксикумарина (CMAC, CMHC и CMF2HC), зеленые флуоресцентные хлорметильные производные флуоресцеин диацетата (CMFDA) и краситель BODIPY™, оранжевые флуоресцентные CMTMR и CMRA, а также красный флуоресцентный CMTPX. CellTracker Blue CMAC, CMHC и CMF2HC, CellTracker Violet, фиолетовое флуоресцентное бромметильное производное кумарина (BMQC), CellTracker Green BODIPY™, CellTracker Orange CMTMR и CellTracker Red CMTPX не требуют ферментативного расщепления для активации их флуоресценции, тогда как зеленый CMFDA и оранжевый CMRA требуют ферментативного расщепления. Непроницаемые продукты реакции хлорметил- или бромметилкумаринов обладают превосходной удерживающей способностью, сильной флуоресценцией и относительно равномерным цитоплазматическим окрашиванием, что делает эти производные потенциально полезными для коррекции артефактов движения при визуализации. CMFDA бесцветен и не флуоресцентен до тех пор, пока цитозольные эстеразы не расщепят ацетаты, высвобождая ярко флуоресцентный продукт.

Помимо яркой флуоресценции и превосходной удерживающей способности, флуоресцентные зонды CellTracker не способствуют цитотоксичности.