Ядерные контрастные вещества Thermo Scientific Pierce DAPI представляют собой высокоочищенные формы красителя диамидино-2-фенилиндола для флуоресцентного окрашивания содержимого ДНК и ядер фиксированных клеток для методов клеточной визуализации.

DAPI (диамидино-2-фенилиндол) — это синий флуоресцентный зонд, который ярко флуоресцирует при селективном связывании с малой бороздкой двухцепочечной ДНК, где его флуоресценция примерно в 20 раз больше, чем в несвязанном состоянии. Его селективность к ДНК и высокая проницаемость для клеток позволяют эффективно окрашивать ядра с небольшим фоном от цитоплазмы. DAPI — это классический ядерный контрокраситель для иммунофлуоресцентной микроскопии, а также важный компонент методов скрининга с высоким содержанием, требующих количественного определения содержания ДНК на основе клеток.

Особенности ядерного контрастирования DAPI:

Краситель DAPI — диамидино-2-фенилиндол — это синий флуоресцентный краситель, специфичный для ДНК.
Удобно — выбирайте порошок или простой в использовании раствор красителя DAPI (1 мг/мл)
Клеточная визуализация — проникающий в клетки краситель эффективен для окрашивания фиксированных клеток и количественной оценки содержания ДНК.
Контр-окрашивание — идеально подходит для использования вместе с обнаружением специфических мишеней с помощью флуоресцентных антител для флуоресцентной микроскопии или скрининга с высоким содержанием (HCS)
Свойства флуоресцентного красителя DAPI:

Альтернативные названия: DAPI Stain, DAPI Dye, DNA Content Counterstain
Химическое название(я): 4,6'-диамидино-2-фенилиндол, дигидрохлорид; 4',6-диамидин-2-фенилиндол; 2-(4-амидинофенил)-6-индолкарбамидина дигидрохлорид
Молекулярная формула : C16H15N5 · 2HCl​​
Молекулярный вес: 350,25
Длина волны возбуждения: 341 ± 3 нм (около 360 нм при связывании с двухцепочечной ДНК)
Длина волны излучения: 452 ± 3 нм (456–460 нм при связывании с двухцепочечной ДНК)
Коэффициент экстинкции: >30 600/M см при 347 нм в метаноле
Номер CAS: 28718-90-3
Чистота: >95% (большинство партий >98%) по данным ВЭЖХ при 240 нм
Растворимость: >1 мг/мл в воде; соединение растворяется в ДМФА, воде и различных нефосфатных водных буферах.
Реактивные группы: отсутствуют; связываются с малой бороздкой двухцепочечной ДНК
В качестве контрокрасителя в методах флуоресцентной визуализации DAPI совместим с антителами и другими зондами, мечеными красителями флуоресцеином (кат. № 53027) и родамин (кат. № 46112), а также с Thermo Scientific DyLight Fluors. DAPI обладает большей фотостабильностью, чем красители Hoechst, хотя Hoechst 33342 можно использовать для визуализации живых клеток, в то время как использование DAPI ограничено фиксированными клетками. DAPI предлагается в виде порошкообразного твердого вещества и водного раствора.

Применение красителя DAPI:

Анализ ДНК в растворе (ссылка 4)
Диагностика микоплазменной инфекции клеточных культур (ссылка 5)
Измерение ядерного содержания и сортировка хромосом в проточной цитометрии (ссылка 6)
Оценка апоптоза (ссылка 7)
Обнаружение ядер и органеллярной ДНК в процедурах иммунофлуоресцентной и in situ гибридизации (ссылки 2,8)
Замена бромистого этидия для окрашивания ДНК в агарозных гелях (ссылки 5,9)
Контрастное окрашивание ядер в гистохимических методах, когда для обнаружения специфических мишеней используются красные флуоресцентные антитела (ссылка 8)
Отчеты также указывают на то, что DAPI будет связываться с полифосфатами и другими полианионами (ссылка 10), декстрансульфатом (ссылка 11) и SDS (ссылка 12).