Набор для выделения тотальных экзосом (из плазмы) позволяет быстро и эффективно обогащать неповрежденные экзосомы из образцов плазмы. Набор состоит из двух частей: реагент для выделения тотальных экзосом (из плазмы) и протеиназа К (20 мг/мл). Реагент для выделения тотальных экзосом обеспечивает простую и надежную концентрацию неповрежденных экзосом из образцов плазмы с протоколом, масштабируемым в зависимости от размера образца. Протеиназа К предоставляется отдельно для дополнительной предварительной обработки плазмы и используется для устранения всех белков плазмы и, таким образом, максимизации чистоты препарата экзосом.

• Максимизируйте извлечение целых экзосом для любого типа последующего применения
• Легко изолируйте экзосомы с помощью нашего простого и надежного протокола
• Избегайте трудоемкого ультрацентрифугирования
• Максимизируйте гибкость — увеличивайте или уменьшайте масштаб в зависимости от размера образца

Связывая молекулы воды, реагент для полной изоляции экзосом вытесняет из раствора менее растворимые компоненты, такие как везикулы, что позволяет собирать их с помощью короткого низкоскоростного центрифугирования. После 10-минутной обработки протеиназой К реагент добавляется в плазму, и раствор инкубируется в течение 30 минут при температуре 2–8 °C. Осажденные экзосомы извлекаются стандартным центрифугированием при 10 000 xg в течение 5 минут при комнатной температуре. Затем осадок ресуспендируется в PBS или аналогичном буфере, и экзосомы готовы к последующему анализу или дальнейшей очистке методами аффинности. Затем общую РНК и белок можно очистить с помощью набора для выделения общей экзосомальной РНК и белка (кат. № 4478545), или же можно использовать интактные экзосомы для биологических исследований их путей, функций и трафика.

Для последующего масс-спектрометрического анализа мы рекомендуем проводить очистку изолированной суспензии экзосом методом гель-электрофореза перед анализом.