CellLight Plasma Membrane-RFP, BacMam 2.0, обеспечивает простой способ маркировки плазматической мембраны красным флуоресцентным белком (RFP) в живых клетках. Просто добавьте реагент к клеткам, инкубируйте в течение ночи, и клетки готовы к визуализации утром.

Хотите маркировать другие клеточные структуры? Узнайте больше об инструментах маркировки флуоресцентных белков CellLight

Эта готовая к использованию конструкция трансфицируется в клетки с помощью технологии BacMam 2.0, где она экспрессирует RFP, слитый с последовательностью миристоилирования/пальмитоилирования из тирозинкиназы Lck. Вы можете наблюдать поведение плазматической мембраны-RFP в живых клетках без окрашивания внутренних мембран, а также использовать несколько отслеживающих или трассирующих красителей для визуализации динамических клеточных процессов. Клетки,

экспрессирующие конструкции CellLight, также можно фиксировать формальдегидом для мультиплексной визуализации с использованием иммуноцитохимических методов.

Технология CellLight:
• Быстрая и удобная : просто добавьте реагент CellLight к клеткам, инкубируйте в течение ночи и визуализируйте или храните замороженные, готовые к анализу клетки для последующего использования.
• Высокая эффективность : до 90% трансдукции широкого спектра линий клеток млекопитающих, включая первичные клетки, стволовые клетки и нейроны.
• Гибкость: ко-трансдукция более одного реагента BacMam для мультиплексных экспериментов или исследований совместной локализации; точный контроль уровней экспрессии путем простого изменения дозы.
• Менее токсична: реагенты CellLight не реплицируются в клетках млекопитающих и подходят для работы с уровнем биологической безопасности (BSL) 1.

Технология BacMam.
Плазменная мембрана CellLight-RFP, BacMam 2.0, представляет собой конструкцию слияния последовательности миристоилирования/пальмитоилирования из тирозинкиназы Lck и TagRFP, обеспечивающую точное и специфическое нацеливание на клеточную плазматическую мембрану-RFP. Эта конструкция слияния упакована в вирус насекомых бакуловирус, который не реплицируется в клетках человека и обозначен как безопасный для использования с уровнем биологической безопасности (BSL) 1 в большинстве лабораторий. Технология BacMam гарантирует, что большинство типов клеток млекопитающих трансдуцируются/трансфицируются с высокой эффективностью и минимальной токсичностью. Эта временная трансфекция может быть обнаружена после ночной инкубации в течение пяти дней — достаточного времени для проведения большинства динамических клеточных анализов. Как и любой метод трансфекции/трансдукции, метод BacMam не трансфицирует/трансдуцирует все клетки с одинаковой эффективностью, что делает его плохо подходящим для исследований клеточной популяции или автоматизированной визуализации/подсчета. Реагенты CellLight идеально подходят для экспериментов, где требуется клеточная или субклеточная колокация, или для исследований клеточных функций, требующих особого разрешения.