Набор для сайт-направленного мутагенеза Thermo Scientific Phusion — это универсальный и эффективный инструмент для введения точечных мутаций, вставок или делеций в любой тип плазмидной ДНК. С помощью этого набора вся плазмида амплифицируется с использованием фосфорилированных праймеров, которые вносят желаемые изменения. Амплифицированный линейный продукт ПЦР, содержащий желаемую мутацию, кольцевидизируется в 5-минутной реакции лигирования с ДНК-лигазой T4. Полученную плазмиду затем можно трансформировать в любые компетентные клетки E. coli

. Оптимальная температура отжига для ДНК-полимераз Phusion может значительно отличаться от температуры полимераз на основе Taq.