Набор DNA Damage Competitive ELISA, предназначенный только для исследовательских целей, обнаруживает все три вида окисленного гуанина: 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозин из ДНК, 8-гидроксигуанозин из РНК и 8-гидроксигуанин из переваренной ДНК из ДНК или РНК. Эти виды могут присутствовать в сыворотке, плазме, слюне, моче, высушенных образцах фекалий и образцах среды для культивирования тканей. Для построения стандартной кривой анализа предоставляется исходный раствор 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозина (8-OHdG), и все образцы следует считывать со стандартной кривой. Стандарты или разбавленные образцы пипеткой вносятся в прозрачный микротитрационный планшет, покрытый антителом для захвата кроличьих антител. Конъюгат 8-гидроксигуанозина добавляется к стандартам и образцам в лунках. Реакция связывания инициируется добавлением в каждую лунку меченого пероксидазой мышиного моноклонального антитела к 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозину. После 1-часовой инкубации планшет промывается и добавляется субстрат. Субстрат реагирует с меченым пероксидазой антителом, которое прореагировало со связанным конъюгатом. После короткой инкубации реакция останавливается, и интенсивность полученного цвета определяется в микротитровальном планшетном ридере, способном проводить измерения при 450 нм.

Строгая проверка
Каждая изготовленная партия этого набора ELISA проходит проверку качества по таким критериям, как чувствительность, специфичность, точность и последовательность от партии к партии. Дополнительную информацию о проверке см. в руководстве.

Целевая информация
Свободные радикалы и другие реактивные виды постоянно генерируются in vivo и вызывают окислительное повреждение биомолекул, процесс, сдерживаемый только существованием множественных антиоксидантных и репарационных систем, а также заменой поврежденных нуклеиновых кислот, белков и липидов. Внутриклеточные виды свободных радикалов (ROS) образуются в результате нормального метаболизма, а внеклеточные формы образуются в результате ультрафиолетового излучения или ионизирующего излучения. Клеточная функция может быть прервана или остановлена, если повреждение ДНК нарушает целостность важной информации, содержащейся в геноме. Когда отдельные основания повреждены, неспецифические ферменты репарации ДНК вырезают повреждения ДНК, чтобы высвободить дезоксинуклеотиды, а гликозилазы репарации, специфичные для оснований, вырезают соответствующее основание. Дезоксинуклеотиды ферментативно гидролизуются до стабильных дезоксинуклеозидов, и эти продукты восстановления транспортируются через кровь и выводятся с мочой. Повреждение РНК отражается в нуклеозидных аддуктах. Среди многочисленных типов окислительного повреждения ДНК образование 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозина (8-OHdG) является повсеместным маркером окислительного стресса. 8-OHdG образуется физиологически и усиливается химическими канцерогенами. Во время восстановления поврежденной ДНК in vivo экзонуклеазами полученный 8-OHdG выводится без дальнейшего метаболизма в мочу. 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозин (8-OHdG) идентичен для всех видов.