Агароза стрептавидина Thermo Scientific Pierce — это агарозная смола со стандартной емкостью из иммобилизованного рекомбинантного белка стрептавидина, используемая в различных методах очистки с помощью аффинной связи с биотином.

Характеристики агарозы стрептавидина:

• Стрептавидин — очищенный рекомбинантный белок стрептавидина (53 кДа, почти нейтральная pI); тетрамерный с четырьмя сайтами связывания биотина на молекулу
• Агарозная смола — подложка представляет собой сшитую 6% гранулированную агарозу (CL-6B), самую популярную смолу для методов аффинной очистки белков
• Инертная и стабильная — стрептавидин иммобилизован беззарядными, устойчивыми к выщелачиванию ковалентными связями, что приводит к низкому неспецифическому связыванию и позволяет многократно использовать без снижения выхода
• Стандартная емкость — эта разновидность гранул имеет обычную загрузку иммобилизованного стрептавидина, обеспечивая связывающую емкость от 1 до 3 мг биотинилированного БСА на мл смолы

Свойства сшитой 6% гранулированной агарозы (CL-6B):
• Поддержка стабильности pH: от 2 до 14 (краткосрочная); от 3 до 13 (долгосрочная)
• Средний размер частиц: от 45 до 165 микрон
• Предел исключения: от 10 000 до 4 000 000 дальтон
• Максимальная объемная скорость потока: прибл. 1 мл/минуту (для колонки диаметром 1 см)
• Максимальная линейная скорость: 30 см в час
• Максимальное давление: менее 25 фунтов на кв. дюйм (1,5 бар)

Области применения:
• Очистка мембранных антигенов в сочетании с биотинилированными моноклональными антителами
• Выделение белков клеточной поверхности, помеченных расщепляемым реагентом биотинилирования
• Выделение гликопротеинов клеточной поверхности с использованием биотинилированного конканавалина А
• Восстановление одноцепочечной биотинилированной ДНК для дидезоксисеквенирования
• Покрытые стрептавидином пластины, используемые для прямого твердофазного секвенирования
• Мутагенез in vitro с покрытыми стрептавидином пластинами
• ДНК-фингерпринтинг с покрытыми стрептавидином пластинами

Агароза Pierce Streptavidin состоит из очищенного рекомбинантного стрептавидина, ковалентно иммобилизованного на высококачественной сшитой 6% агарозе с шариками. Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотинсвязывающий белок. Агарозные гранулы обладают физическими и химическими свойствами, которые позволяют использовать их в различных процедурах аффинности пакетного или колоночного типа. Биотинилированные антитела, белки, пептиды, нуклеиновые кислоты и другие молекулы или комплексы взаимодействия могут быть захвачены, иммунопреципитированы, удалены или очищены из образцов с использованием этой стрептавидиновой смолы.

Стрептавидин представляет собой тетрамерный белок, содержащий четыре биотин-связывающих участка, подобных авидину. Нативный белок из Streptomyces avidiniiне содержит углеводов, имеет кислую pI 5,5 и массу 75 кДа. Рекомбинантный белок, используемый для производства смол Thermo Scientific Pierce Streptavidin, имеет почти нейтральную изоэлектрическую точку и массу 53 кДа. Стрептавидин, как правило, имеет меньше неспецифического связывания, чем авидин (из белка куриного яйца) из-за отсутствия углеводов.